研究结果：

1. ASM 对非小细胞肺癌具有显著的抑制作用

       A. satureioides的甲醇提取物（ASM）和乙酸乙酯提取物（ASE）处理A549细胞后，细胞活力呈浓度依赖性降低。ASM的 IC₅₀（133.6 ± 10.0 μg/mL）显著低于ASE（432.1 ± 64.3 μg/mL）。划痕实验显示，仅用低浓度ASM（50 μg/mL）即可显著抑制细胞迁移。结果表明，ASM对NSCLC的抑制作用优于ASE，因此后续聚焦于ASM研究。

2. 细胞代谢分析

      为了研究 ASM 抗非小细胞肺癌作用的机制，研究者进行了细胞代谢组学分析。正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）显示，在用 ASM 处理后，A549 细胞发生了显著的代谢变化。根据倍数变化（FC）和 p 值标准（FC ≥ 2，p < 0.05），共观察到32种显著差异代谢物，其中16种表现出显著上调，16种表现出下调。对差异代谢物进行了 KEGG 通路富集分析，发现它们主要参与精氨酸生物合成、烟酸和烟酰胺代谢、组氨酸代谢、醚脂代谢、泛酸和辅酶 A 生物合成、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢以及甘油磷脂代谢等通路。

3. LC-MS和网络药理学分析

       为了进一步阐明 ASM 的活性成分和负责治疗 NSCLC 的目标蛋白，研究者使用了 UPLC/Fusion Lumos Orbitrap MS 和网络药理学分析。在ASM中共鉴定出69种化合物，对其进行网络药理学分析明确了ASM抗NSCLS的六种核心成分。网络药理学分析结果显示ASM通过调控10个关键靶蛋白（HSP90AA1、AKT1、EGFR、STAT3、BCL2、CCND1、HIF1A、JUN、ESR1 和 GAPDH）发挥抗 NSCLC 作用。分子对接证实这些成分与靶蛋白稳定结合，而整合分析进一步揭示了其通过调控 11 种代谢物、57 个相关基因及 7 条代谢通路的协同作用机制，展现了 ASM 多成分-多靶点-多通路治疗 NSCLC 的综合效应。

4. 槲皮素抑制肿瘤生长

       ASM的六种活性成分中槲皮素含量最丰富，因此研究者提出它在抗NSCLC中起着重要作用，并对此进行了体内验证。与对照组相比，治疗组肿瘤生长缓慢，大小和重量显著减少（P<0.01），肿瘤坏死因子水平显著下降。H&E 染色图像显示治疗组的肿瘤细胞呈弥漫分布，细胞缩小和死亡，边界不清晰，同时心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏的组织学分析显示，对照组和槲皮素处理组之间没有显著差异。表明槲皮素能够抑制肿瘤生长，在体内具有显著的抗肺癌作用，且对正常组织没有不良反应。

5. 槲皮素处理后的代谢变化研究

        为了阐明槲皮素抗非小细胞肺癌的机制，作者研究了治疗后肿瘤内源性代谢物的变化。比较对照组与槲皮素处理组的代谢轨迹，OPLS-DA结果显示两组完全分离，使用 FC 和 p 值（FC > 1.5 或 FC < 0.67；p < 0.05）构建火山图，揭示了治疗组中 51 个显著改变的代谢物并展示于热图中，其中 19 个上调，32 个下调。KEGG 通路富集分析可视化 20 个通路，其中相关性最强的前五个通路包括组氨酸代谢、泛酸和辅酶 A 生物合成、β-丙氨酸代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢，以及抗坏血酸和醛二酸代谢。

6.MALDI-MSI和代谢网络

        根据MALDI-MSI结果，研究者提出槲皮素通过调控TCA循环关键代谢物（如降低苹果酸、琥珀酸及天冬氨酸水平）及血清素代谢抑制肿瘤生长，同时上调尿苷二磷酸葡萄糖（UDP-葡萄糖）水平阻碍肺癌转移和复发。代谢组学分析揭示槲皮素通过蛋白互作网络（PPI）作用于低氧诱导因子（HIF1A），并通过影响谷氨酰胺酶（GLS）降低谷氨酸转化水平，进而降低辅酶A合成，导致TCA循环活性减弱和脂代谢紊乱（磷脂（PE）、鞘磷脂（PA）和甘油磷脂水平上调），最终通过多靶点协同抑制NSCLC进展。